Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1DF糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次浮现胰脏自身突变到浮现1同型哮喘病理病变的成效率在成人时期就有较好的阐述，多个胰脏自身突变乙型肝炎的成人里面有70%在抗微转换后10在短期内患上哮喘，而随访15年的成人这一比重减小到84%。相对于之下，占去病理1同型哮喘一半以上的同型1同型哮喘的发病机制还无法得到充分的研究者。

更加多的人开始应当用于分阶段系统会来度量1同型哮喘的成效：有机微在浮现多种胰脏自身突变时重回第1阶段，浮现血糖反常时重回第2阶段，浮现病变时重回第3阶段。一些多发胰脏自身突变乙型肝炎的有机微，在1期和2期，成效很慢，并工业发展为发病的1同型哮喘。我们此前阐述了一第一组在首次健康检查到多种胰脏自身突变取样后至少10年无哮喘的较慢成效者，这第一组病变人数少，但形态颇为一致。随后，我们发现胰脏自身淋巴细胞特异性CD8+T细胞质化学反应当在成效极快的病变里面基本不发挥作用，但在近期发病和长年发挥作用的哮喘病变里面很较难健康检查到。这不太可能暗示，与成效病变相对于，这些病变胃溃疡化学反应当的缓冲增强。

早期研究者暗示，尽管缓冲性T细胞质(Treg)数量出现异常，但哮喘病变发挥作用一些新功能缺陷，其里面仅限于对IL-2的化学反应当能力降低。此外，哮喘病变里面的不稳定性CD4+T细胞质不太可能对缓冲非常具抵抗性，展现为不稳定性T细胞质的抑止消散，自然产生的Treg和微外产生的游离Treg，以及淋巴细胞个人经历的CD4+T细胞质里面IL-2化学反应当消散。本研究者的目的是阐述了CD4+缓冲性T细胞质(Treg)在一小群极极快成效者里面的形态，他们的平均年长为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

分析方法：BOX研究者是一项以人群基础上的横向研究者，在21岁以下住院的病变子女里面健康检查1同型哮喘的险恶因素所。我们此前阐述了长年极快成效者的形态，他们保持多重胰脏自身突变乙型肝炎有约10年，但无法浮现哮喘的病理病变，慢性或非同步进行性胃溃疡。随后，10名暂时保持无哮喘并愿意提供大量肠道取样的极快成效者纳入T和B细胞质新功能分析分析方法。在以外的研究者里面，8名慢成效者(SP第一组)，里面位年长43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的胰脏自身突变乙型肝炎。所有的举例来说都位处1同型哮喘成效的1期，尽管一些人随后挽回了胰脏自身突变对某些淋巴细胞的乙型肝炎化学反应当，然而，一名病变仍未位处2期至少6年，但无法浮现病理病变，一名病变被诊疗为哮喘，该受试者72岁，在野外试验中取样时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在的测试里面对该遗传物质同步进行了除此以外评量。裂解外周血单个氘细胞质(PBMCs)，引入多参数流式细胞质心法和T细胞质抑止试验车评量遗传物质里面Treg的阈值、表同型和新功能。应当用于FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、密切系统会性和回归)同步进行无指导聚类分析分析方法，评量Treg表同型。

结果：与肥胖症遗传物质相对于，来自慢成效微的无意识CD4+T细胞质的指导聚类标示出，诱导的无意识CD4+ Treg阈值减小，与糖皮质激素游离的TNFR系统会性细胞(GITR)表示减小有关。一名HbA1c升高的病变与成效极快者和匹配的相符合第一组相对于，Treg序有所相同。新功能分析分析方法暗示，与肥胖症遗传物质相对于，来自极快成效微的Treg介导的CD4+不稳定性T细胞质抑止相比受损。展现为对不稳定性CD4+T细胞质CD25和CD134表示的抑止减小。

所示1 透彻的表同型分析分析方法标示出，CD4+Treg亚同型在慢成效路由表里面减小。由FlowSOM转化成的Treg室，聚集在来自所有遗传物质的活CD4+CD45RA -细胞质上。根据记号物表示鉴定出10个元簇:无意识T细胞质_1;无意识T cell_2;无意识T cell_3;无意识T cell_4;CD49b无意识T细胞质;HLA-DR + GITR +无意识T细胞质;缓存Treg_1;缓存Treg_2;缓存Treg_3;和缓存Treg_4。(a)应当用于9个相同Treg记号转化成的10个元簇的MST。每个链表代表一个集群(100个集群)，非常大的元集群(10个元集群)在链表第一组周围上色。每个链表里面的饼所示问到单个记号的表示层次。(b)每个元聚类的热所示，以标示出整微记号表示。(c, d)为HD第一组(c)和SP第一组(d)转化成所示，以及FlowSOM辨认的每个元簇的基岩。(e-l)相对于轻元素为每个metacluster木箱中央线所示(轻元素> 0.05%)确定为HD和SP第一组:缓存Treg_2 (e),缓存Treg_3 (f),缓存Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +无意识T细胞质(h)、无意识T cell_1(i),无意识T cell_2 (j),无意识T cell_3 (k) n d CD49b无意识T细胞质(l)。浅蓝色圆点代表捐助者SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对字母秩健康检查和。此键适用于所示形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

所示2 应当用于CITRUS的预测模同型证实，Treg阈值的减小是成效极快的徽章。PG门控(a - f)和柑橘分析分析方法(g-k)比较SP举例来说和匹配的HD举例来说在CD4+CD45RA−T细胞质上的差异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社会群微的代表性所示。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3非金属，然后通过HLA-DR和GITR表示同步进行裂解，模拟器FlowSOM社会群微。(b) HD(环纹)和SP(白斑)第一组以及遗传物质SP 606(浅蓝色)里面CD25+ cd127的阈值汇总所示。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+门控子集的木箱中央线所示;(c) HLA-DRloGITR−(缓存Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(缓存Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(缓存Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+缓存T cell)。(g - i)果树簇球状由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3表示强度制做，交叉突出的簇被辨认为SP和HD路由表之间的相同。(j)木箱中央线所示标示出了在SP(白斑)和HD(灰点)第一组里面，CITRUS无意识Treg_3和Treg_4的相对于轻元素(比重)。(k)直方所示标示出每个簇的表同型(粉红色)和Treg记号相对于表示与剧中表示(浅蓝色);上列，缓存Treg_3;上面一路上，缓存Treg_4。剧中与所有其他簇里面记号的表示有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对字母秩健康检查和

所示3 与肥胖症献血者相对于，成效极快者无意识treg的GITR减小。每个无意识CD4+T细胞质元簇(无意识T细胞质_1;无意识T cell_2;无意识T cell_3;CD49b +无意识T细胞质;HLA-DR + GITR +无意识T细胞质;缓存Treg_2;缓存Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)健康检查每个表示记号的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)路由表的表示热所示(sp606不仅限于在内)。(c,d)无意识Treg_4元簇里面所有HD(灰色)、所有SP(浅蓝色)和SP 606(浅蓝色)的FlowSOM GITR表示联结，标示出直方所示(c)和汇总所示(d)。Wilcoxon配对字母秩和健康检查和，p< 0.07(浅蓝色)所有遗传物质仅限于，p< 0.05(浅蓝色)遗传物质SP 606和匹配的HD不仅限于在测试里面。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs里面GITR表示，从PG门控，从所有HD(灰色)、所有SP(浅蓝色)和SP 606(浅蓝色)联结，标示出直方所示(e)和汇总所示(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对字母秩健康检查和

所示4 来自极快成效的CD4+ treg细胞质控制不稳定性CD4+T细胞质的能力降低。SP第一组用浅蓝色的中央线和圆点问到，HD第一组用紫色的中央线和圆点问到，浅蓝色的中央线/圆点问到遗传物质sp606。应当用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞质同步进行分选。CD4+CD25−(这样的话者)被记号为CFSE, Treg按观察的比重滴定。用抗CD3 /28微珠酪氨酸细胞质，培育出3紧接著同步进行流式细胞质心法健康检查。(a-d)与CD4+这样的话者相对于应当的treg培育出(自微)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD这样的话者培育出。(a,b,f) CFSE游离(a,e)和CFSE抑止百分比(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的抑止百分比。应当用于乙型肝炎相符合(诱导的叛离细胞质则有treg)计算抑止百分比。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差分析分析方法。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

所示5 不稳定性CD4+T细胞质对极快成效的T细胞质酪氨酸的抑止非常脆弱。SP第一组用浅蓝色的中央线和圆点问到，HD第一组用紫色的中央线和圆点问到，浅蓝色的中央线/圆点问到遗传物质sp606。应当用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞质同步进行分选。CD4+CD25−(这样的话者)被cfsel记号，treg按观察的比重滴定。用抗CD3 /28微珠酪氨酸细胞质，培育出3紧接著同步进行流式细胞质心法(CD25反染)和细胞质因子分析分析方法。HD Treg与HD、SP或sp606这样的话者协同培育出。(a,b) CFSE游离(a)和CFSE抑止调升(b)。(c,d) CD25抑止调升(c)和CD134抑止调升(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培育出里面的表示。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差分析分析方法。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论点：我们得出的论点是，来自极快成效子的酪氨酸无意识CD4+Treg在GITR表示里面得到了扩展到和颇为丰富，强调了进一步研究者Treg在1同型哮喘后果有机微里面的异质性的实质。

译文译文：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28